二、气孔蒸腾
气孔是植物进行体内外气体交换的重要门户。水蒸气、CO2、O2都要共用气孔这个通道，气孔的开闭会影响植物的蒸腾、光合、呼吸等生理过程。
气孔是植物叶片表皮组织的小孔，一般由成对的保卫细胞(guard cell)组成。保卫细胞四周环绕着表皮细胞，毗连的表皮细胞如在形态上和其它表皮细胞相同，就称之为邻近细胞(neighbouring
cell)，如有明显区别，则称为副卫细胞(subsidiary cell)。保卫细胞与邻近细胞或副卫细胞构成气孔复合体。保卫细胞在形态上和生理上与表皮细胞有显著的差别。
（一）气孔的形态结构及生理特点
１.气孔数目多、分布广 气孔的大小、数目和分布因植物种类和生长环境而异（表2-3）。一般单子叶植物叶的上下表皮都有气孔分布，而双子叶植物主要分布在下表皮。浮水植物气孔都分布在上表皮。
２.气孔的面积小，蒸腾速率高 气孔一般长约7～30μm ，宽约1～6μm。而进出气孔的CO2和H2O分子的直径分别只有0.46nm和0.54nm，因而气体交换畅通。气孔在叶面上所占的面积，一般不到叶面积的1%，气孔完全张开也只占1％～2％，但气孔的蒸腾量却相当于所在叶面积蒸发量的10％～50％，甚至达到100%。也就是说，经过气孔的蒸腾速率要比同面积的自由水面快几十倍，甚至100倍。这是因为气体通过多孔表面扩散的速率,不与小孔的面积成正比，而与小孔的周长成正比。这就是所谓的小孔扩散律(small
pore diffusion law)。这是因为在任何蒸发面上，气体分子除经过表面向外扩散外，还沿边缘向外扩散。在边缘处，扩散分子相互碰撞的机会少，因此扩散速率就比在中间部分的要快些。扩散表面的面积较大时（例如大孔），周长与面积的比值小，扩散主要在表面上进行，经过大孔的扩散速率与孔的面积成正比。然而当扩散表面减小时，周长与面积的比值即增大，经边缘的扩散量就占较大的比例,且孔越小,所占的比例越大，扩散的速度就越快（表2-4）。
３.保卫细胞体积小,膨压变化迅速 保卫细胞比表皮细胞小得多。一片叶子上所有保卫细胞的体积仅为表皮细胞总体积的1/13或更小。因此，
只要有少量溶质进出保卫细胞，便会引起保卫细胞膨压(turgor pressure)迅速变化，调节气孔开闭。
４.保卫细胞具有多种细胞器 保卫细胞中细胞器的种类比其他表皮细胞中的多，特别是含有较多的叶绿体。保卫细胞中的叶绿体具有光化学活性，能进行光合磷酸化合成ATP，只是缺少固定CO2的关键酶Rubisco，但是保卫细胞的细胞质中含有PEP羧化酶，能进行PEP的羧化反应，其产物为苹果酸(PEP+HCO3-→苹果酸)。叶绿体内含有淀粉体，在白天光照下淀粉会减少，而暗中淀粉则积累。这和正常的光合组织中恰好相反。此外，保卫细胞中还含有异常丰富的线粒体，为叶肉细胞的5～10倍，推测其呼吸旺盛，能为开孔时的离子转运提供能量。
５.保卫细胞具有不均匀加厚的细胞壁及微纤丝结构 高等植物保卫细胞的细胞壁具有不均匀加厚的特点。例如水稻、小麦等禾本科植物的保卫细胞呈哑铃形(dumbbell
shape)，中间部分细胞壁厚，两端薄，吸水膨胀时，两端薄壁部分膨大，使气孔张开；棉花、大豆等双子叶植物和大多数单子叶植物的保卫细胞呈肾形(kidney
shape),靠气孔口一侧的腹壁厚,背气孔口一侧的背壁薄。并且在保卫细胞壁上有许多以气孔口为中心辐射状径向排列的微纤丝, 它限制了保卫细胞沿短轴方向直径的增大。当保卫细胞吸水，膨压加大时，外壁向外扩展，并通过微纤丝将拉力传递到内壁，将内壁拉离开来，气孔就张开。
图2-11 肾形气孔（A）和草形状气孔的饿保卫细胞和表皮细胞中纤维素的基本排布
6.保卫细胞与周围细胞联系紧密 保卫细胞与副卫细胞或邻近细胞间没有胞间连丝，相邻细胞的壁很薄，质膜上存在有ATPase、K+通道，另外在保卫细胞外壁上还有外连丝(ectodesmata)结构，它也可作为物质运输的通道。这些结构有利于保卫细胞同副卫细胞或邻近细胞在短时间内进行H+、K+交换，以快速改变细胞水势。而有胞间连丝的细胞，细胞间的水和溶质分子可经胞间连丝相互扩散，不利于二者间建立渗透势梯度。
另外，保卫细胞能感受内、外信号而调节自身体积，从而控制气孔大小，主宰植物体与外界环境间的水分、气体等交换。因此，保卫细胞可说得上是植物体中奇妙的细胞。
（二）气孔运动的机理
气孔运动是由保卫细胞水势的变化而引起的。20世纪70年代以前，人们认为保卫细胞间水势的变化是由细胞中淀粉与葡萄糖的相互转变引起的，曾流行过“淀粉—糖转化学说”，即淀粉转化为葡萄糖时开孔，葡萄糖转化为淀粉时闭孔。以后的实验证明，保卫细胞的水势变化是由K+及苹果酸等渗透调节物质进出保卫细胞引起的（表2-5）。下面介绍有关气孔运动的两种学说。
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1.无机离子泵学说(inorganic ion pump
theory)又称K+泵假说。日本学者于1967年发现照光时，漂浮于KCl溶液表面的鸭跖草表皮的保卫细胞中K+浓度显著增加，气孔就张开。用微型玻璃钾电极插入保卫细胞及其邻近细胞可直接测定K+浓度变化。照光或降低CO2浓度，都可使保卫细胞逆着浓度梯度积累K+，使K+达到0.5mol·L-1，溶质势可降低2MPa左右，引起水分进入保卫细胞，气孔张开；暗中或施用脱落酸时，K+由保卫细胞进入副卫细胞和表皮细胞，使保卫细胞水势升高，失水造成气孔关闭。研究表明，保卫细胞质膜上存在着H+ATP酶（H+pumping
ATPase），它可被光激活，能水解保卫细胞中由氧化磷酸化或光合磷酸化生成的ATP，产生的能量将H+从保卫细胞分泌到周围细胞中,使得保卫细胞的pH值升高，质膜内侧的电势变得更低，周围细胞的pH值降低。它驱动K+从周围细胞经过位于保卫细胞质膜上的内向K+通道（inward
K+channel）进入保卫细胞，再进一步进入液泡，K+浓度增加，水势降低，水分进入,气孔张开。
实验还发现，在K+进入保卫细胞的同时，还伴随着等量负电荷的阴离子进入，以保持保卫细胞的电中性，这也具有降低水势的效果。在暗中，光合作用停止，H+ATP酶因得不到所需的ATP而停止做功，从而使保卫细胞的质膜去极化(depolarization)，以驱使K+经外向K+通道(outward
K+ channel)向周围细胞转移，并伴随着阴离子的释放，这样导致了保卫细胞水势升高，水分外移，使气孔关闭。在干旱胁迫(drought
stress)下，脱落酸含量增加，可通过增加胞质钙浓度，使得保卫细胞的质膜去极化，驱动外向K+通道，促进K+、Cl-流出,同时抑制K+流入，以降低保卫细胞膨压，导致气孔关闭。
２.苹果酸代谢学说(malate metabolism theory)
20世纪70年代初以来，人们发现苹果酸在气孔开闭运动中起着某种作用。在光照下, 保卫细胞内的部分CO2被利用时,pH就上升至8.0～8.5，从而活化了PEP羧化酶,它可催化由淀粉降解产生的PEP与HCO3-结合形成草酰乙酸,并进一步被NADPH还原为苹果酸。
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苹果酸被解离为2H+和苹果酸根，在H+／K+泵的驱使下，H+与K+交换，保卫细胞内K+浓度增加,水势降低；苹果酸根进入液泡和Cl-共同与K+在电学上保持平衡。同时，苹果酸的存在还可降低水势，促使保卫细胞吸水，气孔张开。当叶片由光下转入暗处时，该过程逆转。近期研究证明，保卫细胞内淀粉和苹果酸之间存在一定的数量关系。
综合上述学说，气孔运动的可能机理可用图2-12来说明。
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图 2-12光下气孔开启的机理
光照下保卫细胞液泡中的离子积累。由光合作用生成的ATP驱动H+泵，向质膜外泵出H+，建立膜内外的H+梯度，在H+电化学势的驱动下，K+经K+通道、Cl-经共向传递体进入保卫细胞。另外，光合作用生成苹果酸。K+、Cl-和苹果酸进入液泡，降低保卫细胞的水势。B.气孔开启机理图解。
（三）影响气孔运动的因素
气孔运动(stomatal movement)受着内部因素和外界因素的调节。 气孔的特殊结构和生理特性使气孔运动具有调节的功能。以下讨论外界因素对气孔运动的影响。
1.光 光是气孔运动的主要调节因素。光可促进保卫细胞内苹果酸的形成和K+、Cl-的积累。一般情况下,光可促进气孔张开,暗中则气孔关闭。但景天科酸代谢植物例外，它们的气孔通常是白天关闭,夜晚张开。不同植物气孔张开所需光强有所不同，例如烟草只要有完全日照的2.5%光强即可，而大多数植物则要求较高的光强。光促进气孔开启的效应有两种，一种是通过光合作用发生的间接效应，这种效应被光合电子传递抑制剂DCMU所抑制:另一种是通过光受体感受光信号而发生的直接效应，这种效应不被DCMU抑制。红光和蓝光都可引起气孔张开，但蓝光使气孔张开的效率是红光的10倍。通常认为，红光是通过间接效应，而蓝光是直接对气孔开启起作用的。红光的光受体可能是叶绿素；蓝光的光受体可能是隐花色素(cryptochrome)。有人认为蓝光能活化质膜H+-ATP酶，不断泵出H+，形成跨膜电化学势梯度，它是K+通过K+通道移动的动力，可使保卫细胞内K+浓度增加，水势降低，气孔张开。
2.二氧化碳 CO2对气孔运动影响很大。低浓度CO2促进气孔张开,高浓度CO2能使气孔迅速关闭（无论光下或暗中都是如此）。在高浓度CO2下，气孔关闭的可能原因是：①高浓度CO2会使质膜透性增加，导致K+泄漏，消除质膜内外的溶质势梯度，②CO2使细胞内酸化，影响跨膜质子浓度差的建立。
3.温度 气孔开度(stomatal aperture)一般随温度的上升而增大。在30℃左右气孔开度最大，超过30℃或低于10℃的低温下，气孔部分张开或关闭。这表明气孔运动是与酶促反应有关的生理过程。
4.水分 气孔运动与保卫细胞膨压变化密切相关, 而膨压变化又是由于水分进出保卫细胞引起的，因此，叶片的水分状况是直接影响气孔运动的关键因素。植物处于水分胁迫条件下气孔开度减小，以减少水分的丢失。如果久雨，表皮细胞为水饱和，挤压保卫细胞，气孔会关闭。如果蒸腾过于强烈，保卫细胞失水过多，即使在光下，气孔也会关闭。
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5.植物激素 细胞分裂素和生长素促进气孔张开，低浓度的脱落酸(10-6mol·L-1)会使气孔关闭。采用酶放大的免疫鉴定法(enzyme
amplified immunoassay)测定单个细胞中的脱落酸含量显示，当叶片未受到水分胁迫时，保卫细胞中含有微量脱落酸，当叶片因蒸腾失水而使其鲜重降低10％时，保卫细胞的脱落酸可增加20倍。脱落酸可作为信使，通过促进膜上外向K+通道开放，使K+排出保卫细胞，而导致气孔关闭。
（四）影响气孔蒸腾的内外因素
气孔蒸腾本质上是一个蒸发过程。气孔蒸腾的第一步是位于气孔下腔(substomatal cavities)周围的叶肉细胞的细胞壁中的水分变成水蒸气，然后经过气孔下腔和气孔扩散到叶面的扩散层，再由扩散层扩散到空气中去。蒸腾速率与水蒸气由气孔向外的扩散力成正比，而与扩散途径的阻力成反比。扩散力大小决定于气孔下腔蒸气压与叶外蒸气压之差，即蒸气压梯度(vapor
pressure gradient)。 蒸气压差愈大，蒸腾速率愈快；反之，则慢。扩散阻力包括气孔阻力和扩散层阻力，其中气孔阻力主要受气孔开度制约，扩散层阻力主要决定于扩散层的厚薄。气孔阻力大，扩散层厚，蒸腾慢；反之则快。
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１.内部因素对气孔蒸腾的影响
(1)气孔频度 气孔频度(stomatal frequency)为1mm-2叶片气孔数上的，气孔频度大有利于蒸腾的进行。
(2)气孔大小 气孔孔径较大，内部阻力小，蒸腾较强。
(3)气孔下腔 气孔下腔容积大，叶内外蒸气压差大，蒸腾快。
(4)气孔开度 气孔开度大，蒸腾快，反之，蒸腾减弱。
(5)气孔构造 气孔构造不同也会影响蒸腾作用，气孔下陷的，扩散层相对加厚，阻力大，蒸腾较慢。
2.外界条件对气孔蒸腾的影响 蒸腾速率取决于叶片内外的蒸气压差和扩散途径阻力的大小。所以，凡是影响叶片内外蒸气压差和扩散途径阻力的外界条件，都会影响蒸腾速率的高低。
(1)光照 光对蒸腾作用的影响首先是引起气孔的开放，减少气孔阻力，从而增强蒸腾作用。其次，光可以提高大气与叶子温度，增加叶内外蒸气压差，加快蒸腾速率。
(2)温度 温度对蒸腾速率影响很大。当大气温度升高时，叶温比气温高出2～10℃,因而，气孔下腔蒸气压的增加大于空气蒸气压的增加，这样叶内外蒸气压差加大，蒸腾加强。当气温过高时，叶片过度失水，气孔会关闭，使蒸腾减弱。
(3)湿度 在温度相同时，大气的相对湿度越大，其蒸气压就越大，叶内外蒸气压差就变小，气孔下腔的水蒸气不易扩散出去，蒸腾减弱；反之，大气相对湿度较低，则蒸腾速度加快。
(4)风速 风速较大时，可将叶面气孔外水蒸气扩散层吹散，而代之以相对湿度较低的空气，既减少了扩散阻力，又增大了叶内外蒸气压差，可以加速蒸腾。强风可能会引起气孔关闭或开度减小，内部阻力加大，蒸腾减弱。
蒸腾作用的昼夜变化主要是由外界条件所决定的。以水稻为例，在一天当中，早上7 时开始逐渐增大，到上午10时迅速上升，中午13时左右达到高峰，而下午14时后逐渐下降，18时后则迅速下降。蒸腾强度的这种日变化是与光强和气温变化一致的，特别是与光强的关系更为密切。
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